Offner, Nicolas (2002) Analyse des propriétés d'un variant d'épissage de la cycline B et caractérisation d'un de ses partenaires. PhD thesis, INAPG p.119.
Abstract
La cycline B est un des régulateurs clef du cycle cellulaire, associée à Cdc2 elle forme le MPF (Maturation Promoting Factor). Ce complexe contrôle la transition entre phases G2 et M du cycle cellulaire. Au laboratoire, un variant d'épissage de la cycline B d'oursin a été découvert. Il lui manque la partie C-terminale, dans laquelle certains résidus sont très conservés.
Au cours de ce travail, le même variant a été cloné chez l'étoile de mer. Ses partenaires ont été recherchés par criblage de banque en double hybride chez la levure ainsi qu'en chromatographie d'affinité. Cette dernière technique a permis d'isoler une protéine de 15 kDa (P15) qui s'associe à la cycline B même en l'absence de Cdc2. Une particularité de cette protéine est d'exister sous trois formes alléliques. La P15 est localisée au niveau du fuseau de division. Des exprériences de micro-injections ont montré qu'elle joue un rôle dans la sortie de méiose, vraisemblablement en liaison avec la dégradation de la cycline B.
Parallèlement, le rôle des résidus manquant chez le variant d'épissage a été étudié par la mutagénèse du C-terminal de Clb2 de levure. Ces résidus sont importants pour la localisation de la cycline mais aussi pour son association correcte avec Cdc2.
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